柴麗月1，辛志宏1，蔡 晶2，俞美香3，胡秋輝1, 
（1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院，江蘇 南京 210095；2.江蘇省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心所，江蘇 南京 210029；3.江蘇省環(huán)境檢測中心，江蘇 南京 210036） 
 

    摘要：采用氣相色譜法測定14種食品中5種鄰苯二甲酸酯[鄰苯二甲酸二甲酯（ DMP）、鄰苯二甲酸二乙酯（DEP）、 鄰苯二甲酸二乙酯（DBP）、鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）、鄰苯二甲酸二正辛酯（DnOP）]的含量。樣品經(jīng)正 己烷溶解、超聲波輔助提取、固相萃取濃縮富集等預(yù)處理，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。結(jié)果表明，該分析 條件下樣品的回收率為72.3%～101.5%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.69%～5.84%，說明本方法準(zhǔn)確可靠。14種食品中檢出 的鄰苯二甲酸酯類約69%的含量高于歐洲規(guī)定的每天0.3 mg/kg體重的標(biāo)準(zhǔn)，表明鄰苯二甲酸酯類污染物在被檢食 品中有較大的的遷移。 
 

    關(guān)鍵詞：鄰苯二甲酸酯；檢測；氣相色譜 
 

    中圖分類號：TS207.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號：1002-6630（2008）07-0362-04 
 

    鄰苯二甲酸酯類（phthalates，PAEs）作為塑料增塑 劑，因增大產(chǎn)品的可塑性和柔韌性而廣泛地應(yīng)用于日常 生活中。在農(nóng)藥載體、驅(qū)蟲劑、染料助劑，以及涂 料和潤滑油中都有使用。它具有種類多、難以降解、 生物富集性強(qiáng)的特點(diǎn)，對人體、生物體及植物均有較 大的毒性，該類污染物對人類的危害主要表現(xiàn)在致癌、 致畸性以及免疫抑制性，尤以人體生殖功能異常zui為引 人注目[1-3]。在塑料制品中，鄰苯二甲酸酯與聚烯烴類塑料分子是相溶的，兩者間并沒有嚴(yán)格的化學(xué)結(jié)合鍵， 因此在使用過程中，容易從塑料中遷移到外環(huán)境，造 成對食品、土壤、水和空氣的污染[4-6]。 
 

    由于塑料制品使用方便，日常生活經(jīng)常用來盛裝食 品，如各種塑料盒、塑料袋及鋁箔袋食品容器等往往 都含有PAEs[7]，而PAEs又很容易從塑料中溶出，所以 幾乎所有的人每天都要接觸它，呼吸的空氣、喝的水、 吃的蔬菜、水果、畜產(chǎn)品、水產(chǎn)品甚至熟食的包裝袋中均可能含有PAEs。 基于上述原因，PAEs污染已受到世界各國的高度 重視。美國、日本以及歐洲許多國家都將PAEs列入優(yōu) 先監(jiān)測的黑名單，美國環(huán)保局129種重點(diǎn)控制的污染物 黑名單中列入了6種鄰苯二甲酸酯：鄰苯二甲酸二（2-乙 基己基）酯（DEHP）、鄰苯二甲酸二甲酯（DMP）、鄰苯二 甲酸二丁酯 （DBP）、鄰苯二甲酸二乙酯（DEP）、鄰苯二 甲酸二正辛酯（DnOP）、鄰苯二甲酸丁基酯（BBP）；日本 將鄰苯二甲酸二正丁酯、鄰苯二甲酸二異丁酯、鄰苯 二甲酸二正辛酯、鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯、鄰苯 二甲酸二異庚酯、鄰苯二甲酸二異癸酯列入重點(diǎn)環(huán)境調(diào) 查物質(zhì)名單中，我國也在水中優(yōu)先控制污染物黑名單中 列入了DMP、DBP、DEHP[8]。目前食品包裝袋中鄰苯 二甲酸酯的檢測方法及其相關(guān)研究較多[9-11]，而對食品 包裝袋中鄰苯二甲酸酯向食品中遷移的研究鮮有報(bào)道。 本研究選定5種典型的鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)（鄰苯二 甲酸二甲酯（DMP）、鄰苯二甲酸二乙酯（DEP）、鄰苯二 甲酸二丁酯 （DBP）、鄰苯二甲酸丁基酯（BBP）、鄰苯二 甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）、鄰苯二甲酸二正辛酯 （DnOP））為檢測目標(biāo)，采用固相萃取技術(shù)對上述5種物質(zhì) 進(jìn)行富集分離，氣相色譜法進(jìn)行定性、定量測定，以期對食品包裝材料中鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)向食品中的遷 移作初步判定。 
 

    1 材料與方法 
 

    1.1 材料與試劑 
 

    鄰苯二甲酸二甲酯（DMP）、鄰苯二甲酸二乙酯 （DEP）、鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸丁基酯 （BBP）、鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）、鄰苯二 甲酸二正辛酯（DnOP） （6種標(biāo)準(zhǔn)品純度均大于99.5%） 國 家環(huán)?？偩謽?biāo)準(zhǔn)樣品研究所；乙酸乙酯、丙酮、二 氯甲烷、甲醇、正己烷（均為色譜純） 美國TEDIA公 司；*（分析純，200℃烘3h后備用）；超純水 自制。 
 

    1.2 儀器與設(shè)備 
 

    Agilent 6890氣相色譜儀（配有火焰離子化檢測器 （FID））；HP-5彈性石英毛細(xì)管柱（30.0m×320μm，0.25 μm）；Eppendorf 可調(diào)式移液器；Mettler AE 260 DeltaRange電子分析天平 梅特勒-托利多儀器有限公 司；KQ-250DB 型數(shù)控* 昆山市超聲儀器 有限公司；TurbovapⅡ樣品濃縮儀 美國Caliper公司； 真空多管固相萃取裝置 Supeclco公司；固相萃取小柱 （500mg/3ml） 0.45μm 針筒式微膜過濾器 Agilent公司。 
 

    1.3 分析步驟 
 

    1.3.1 樣品處理 
 

    1.3.1.1 油脂類固體食品 
 

    各取雞肉、豬肉、豬肝、香腸、魚肉、蝦肉、 膨化食品50g勻漿放入具塞三角瓶中，加入100 ml正己 烷，20℃水浴超聲萃取1h，浸泡過夜。提取液經(jīng)無水 硫酸鈉過濾，氮吹濃縮至1ml，待過柱。 稱取奶粉50g放入具塞三角瓶中，加入150ml的正 己烷，20℃水浴超聲萃取1h，浸泡過夜。提取液經(jīng)無 水硫酸鈉過濾，氮吹濃縮至1ml，待過柱。 
 

    1.3.1.2 油脂類液體 
 

    取食用油0.5g于10 ml試管中，加入10ml正己烷， 在旋渦混合器上充分混勻，取上清夜過0.45μm濾膜， 過濾后進(jìn)樣。 
 

    1.3.1.3 非油脂類蔬菜、水果 取茭白、青菜、香菇、蘋果、紅棗的均勻樣品 各50g，加入100ml正己烷，20℃水浴超聲萃取1h，浸 泡過夜。提取液經(jīng)*過濾，氮吹濃縮至1ml， 過0.45μm濾膜，過濾后進(jìn)樣。 
 

    1.3.2 樣品預(yù)處理 
 

    吸取1ml 樣品提取液過預(yù)先用乙酸乙酯活化過的 500mg/3ml固相萃取柱進(jìn)行濃縮富集，上樣完畢后，用 3ml乙酸乙酯洗脫，洗脫速率為1ml/min，用10 ml氮吹 管收集洗脫液，氮吹濃縮至1ml，過0.45μm的一次性 針筒式微膜過濾器，氣相色譜直接進(jìn)樣分析。 
 

    1.4 色譜條件 
 

    色譜柱：HP-5彈性石英毛細(xì)管色譜柱（30.0m×320μm， 0.25μm）；載氣 N2：2.5ml/min；燃?xì)釮2：30ml/min； 助燃?xì)猓?0ml/min；進(jìn)樣溫度：250℃；FID檢測器溫 度：300℃；柱溫條件：初始溫度150℃，保持1min， 以每分鐘 60℃升溫至240℃，保持1min，以每分鐘40 ℃升溫至260℃，保持5min。進(jìn)樣量：1μl；分流進(jìn) 樣；分流比：5:1。 
 

    2 結(jié)果與分析 
 

    2.1 定性分析 
 

    由于鄰苯二甲酸酯類化合物沸點(diǎn)較高，而且待分離 的5種PAEs分子量相差比較大，程序升溫所需要的溫 度較高，極性越強(qiáng)的色譜柱能達(dá)到的溫度越低。因此， 本實(shí)驗(yàn)選擇弱極性的 HP-5（5%的苯基十95%聚二甲基硅 氧烷）熔融彈性石英毛細(xì)管柱分離5種PAEs。從圖1可 見，DMP、DEP、DBP、DEHP、DnOP 在10min 之 內(nèi)*分離。 
 

    2.2 定量分析 
 

    在定性的基礎(chǔ)上，采用外標(biāo)峰面積法定量，用二 氯甲烷配制DMP、DEP、DBP、基酯（BBP）、DEHP、 DnOP混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別為濃度為1.00、2.00、5.00、10.00、50.00mg/L，進(jìn)樣后，以峰面積Y對濃度X進(jìn) 行進(jìn)行線性回歸，回歸方程和相關(guān)系數(shù)見表1。由表1 可知，5 種PAEs 相關(guān)系數(shù)較高，滿足實(shí)驗(yàn)要求。

     2.3 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn) 
 

    為了驗(yàn)證方法的準(zhǔn)確度，對樣品進(jìn)行了高、中、 低三個(gè)不同水平的標(biāo)準(zhǔn)添加回收實(shí)驗(yàn)，每一水平分別做 三份平行實(shí)驗(yàn)，計(jì)算平均回收率和標(biāo)準(zhǔn)偏差。 稱取9份鉸成勻漿的豬肉樣品（不含PAEs化合物）， 按照添加水平為的5、10、50mg/L 三個(gè)濃度水平進(jìn)行 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，按照1.3.1.1所述前處理方法進(jìn)行處理， 每個(gè)濃度平行測定三次，根據(jù)峰面積外標(biāo)法計(jì)算含量， 結(jié)果見表2。 

    由表2可知，樣品的回收率為72.3%～101.5%之間， RSD為2.69%～5.84%，均小于10%，表明方法具有較 高的準(zhǔn)確度和精密度。 
 

    2.4 樣品測定 
 

    處理好的樣品按1.4色譜條件進(jìn)行分析，測定PAEs 的量，樣品測定色譜圖見圖2，測定結(jié)果見表3。由表 3可知，采集的市售食品中，絕大部分都檢測到鄰苯二 甲酸酯類污染物。其中食用油和油炸食品中含量較高， 是由于鄰苯二甲酸酯是脂溶性的化合物，接觸到油脂時(shí) 會(huì)從包裝材料中溶出，轉(zhuǎn)移到食品中。許多蔬菜、水 果都采用塑料大棚種植，所以茭白、青菜中含量亦較 高，這可能是由于大棚中空氣和土壤中的鄰苯二甲酸酯 污染物通過生物富集作用進(jìn)入果蔬的[12-13]。在被檢出有 PAEs的樣品中，幾乎都有DEHP，因?yàn)镈EHP是塑料 中主要的增塑劑，它的生產(chǎn)量和使用量都遠(yuǎn)高于其他的 鄰苯二甲酸酯類化合物。

    從表3可以看出，各類食品中檢出的鄰苯二甲酸酯 含量都很高，濃度在0.08～5.78mg/kg的范圍內(nèi)。其中 檢出zui低的是大棗，其DEHP含量為0.08±0.002mg/kg， 遠(yuǎn)大于英國農(nóng)漁食品部規(guī)定的DEHP 的每日耐受量 為0.05mg/kg bw每天的標(biāo)準(zhǔn)。大多數(shù)檢出鄰苯二甲酸酯 類污染物含量都高于歐洲規(guī)定的全部鄰苯二甲酸酯的每人每天的全部耐受量為0.3mg/kg bw每天的標(biāo)準(zhǔn)[15]。

    3 結(jié) 論 
 

    本實(shí)驗(yàn)選用油脂類固體食品、油脂類液體、非油 脂類蔬菜、水果三類14 種食品作為研究對象，樣品經(jīng) 正己烷溶解、超聲波輔助提取、固相萃取濃縮富集等 預(yù)處理后氣相色譜分析，得出如下結(jié)論：（1）對樣品進(jìn)行 添加回收實(shí)驗(yàn)，當(dāng)添加鄰苯二甲酸酯類增塑劑濃度為 5～50mg/kg時(shí)，回收率為72.3%～101.5%之間，RSD 為2.69%～5.84%，說明本方法準(zhǔn)確可靠；（2）檢測結(jié)果 表明，除了豬肉樣品外，上述食品均有不同程度PAEs 污染。14種樣品中，都檢出了DEHP，濃度在0.08～ 5.78mg/kg的范圍內(nèi)，其中檢出zui低的樣品中DEHP含量 為0.08±0.002mg/kg，遠(yuǎn)大于英國農(nóng)漁食品部規(guī)定的 DEHP的每日耐受量為0.05mg/kg bw每天的標(biāo)準(zhǔn)。檢出的 鄰苯二甲酸酯類污染物中有大于69%的含量大于0.3mg/kg， 高于歐洲規(guī)定的全部鄰苯二甲酸酯的每人每天的全部耐 受量為0.3mg/kg bw每天的標(biāo)準(zhǔn)。 
 

    人類長期食用這些含污染物的食品，通過物質(zhì)與功 能的積蓄，對人體健康產(chǎn)生的慢性與遠(yuǎn)期的危害不可忽 視。大量研究表明，人和動(dòng)物體內(nèi)殘留有一定濃度的 PAEs，將嚴(yán)重影響到人類的生殖系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和神 經(jīng)系統(tǒng)，并威脅到人類生存。因此如何控制此類化合 物對環(huán)境和食品的污染，預(yù)防其對人類健康造成的危 害，應(yīng)該引起我們的高度關(guān)注。